走進(jìn)儀器 | 紫外可見(jiàn)分光光度計UV3100

紫外可見(jiàn)分光光度計是基于紫外可見(jiàn)分光光度法原理，利用物質(zhì)分子對紫外可見(jiàn)光譜區的輻射吸收來(lái)進(jìn)行分析的一種分析儀器。

1852年

比爾(Beer)參考了布給爾(Bouguer)在1729年和朗伯(Lambert)在1760年所發(fā)表的文章，提出了分光光度的基本定律，即液層厚度相等時(shí)，顏色的強度與呈色溶液的濃度成比例，從而奠定了分光光度法的理論基礎，這就是著(zhù)名的朗伯比爾定律。

1854年

杜包斯克(Duboscq)和奈斯勒(Nessler)等人將朗伯比爾定律應用于定量分析化學(xué)領(lǐng)域，并且設計了第一臺比色計。

1918年

美國國家標準局制成了第一臺紫外可見(jiàn)分光光度計。此后，紫外可見(jiàn)分光光度計經(jīng)不斷改進(jìn)，又出現自動(dòng)記錄、自動(dòng)打印、數字顯示等各種類(lèi)型的儀器，使分光光度法的靈敏度和準確度也不斷提高，應用范圍不斷擴大。

紫外可見(jiàn)分光光度計主要由光源、單色器、吸收池、檢測器和信號處理器等部件組成。

（1）光源：提供符合要求的入射光；

（2）單色器：將光源產(chǎn)生的復合光分解為單色光和分出所需的單色光束；

（3）吸收池：又叫比色皿，用于盛放待測溶液和決定透光液層厚度的器件；

（4）檢測器：將透過(guò)吸收池的光信號變成可測的電信號；

（5）信號顯示系統：數字顯示和自動(dòng)記錄型裝置。

（1）細菌培養：OD測量通常使用600nm的波長(cháng)快速進(jìn)行測試，以估計細胞濃度并跟蹤生長(cháng)。

（2）藥物分析：最常見(jiàn)的用途之一是在制藥行業(yè)。如：Kuljan in 等人通過(guò)將阿-侖 -膦- 酸- 鈉與Fe3+絡(luò )合，用紫外分光光度法測定了 阿-侖- 膦 -酸- 鈉 的含量。

（3）水質(zhì)分析：如《GB/T 5750.6-2006 生活飲用水標準檢驗方法 金屬指標》水中鋁離子與水楊基熒光酮及陽(yáng)離子表面活性劑氯代十六烷基呲淀在 pH 5.2~6.8 范圍內形成玫瑰紅色三元絡(luò )合物，可比色定量。

（4）其他應用：環(huán)境監測、教學(xué)研究、計量校準、石油化工等。

（1）波長(cháng)準確度的重要性

波長(cháng)準確度是指波長(cháng)的實(shí)際測定值與理論值(真值)的差，其波長(cháng)準確度是很重要的技術(shù)指標。若要比對兩臺紫外可見(jiàn)分光光度計對同一樣品的分析測試結果，如果儀器的波長(cháng)準確度不好，就無(wú)法進(jìn)行比較，或比較不出正確的結果。同一物質(zhì)進(jìn)行測試時(shí)，由于不同波長(cháng)時(shí)摩爾吸光系數不同，就會(huì )有不同的靈敏度，即使是同一樣品，測試的數據也會(huì )不相同。如果使用者要用一臺紫外可見(jiàn)分光光度計做定量分析，若儀器的波長(cháng)準確度不好，也會(huì )因儀器的波長(cháng)誤差而產(chǎn)生很大的分析誤差。

（2）穩定性的重要性

其穩定性應包括基線(xiàn)漂移和光度重復性?xún)蓚€(gè)方面。使用時(shí)有一個(gè)很重要的原則或宗旨就是儀器要穩定可靠。如果一臺儀器的穩定性差，就不可能得到滿(mǎn)意的分析測試結果。儀器的穩定性是制造、挑選或使用紫外可見(jiàn)分光光度計的關(guān)鍵問(wèn)題之一。

有些使用者把基線(xiàn)漂移作為穩定性，實(shí)際上基線(xiàn)漂移只是穩定性的內容之一。如果一臺紫外可見(jiàn)分光光度計的基線(xiàn)漂移符合使用要求，但其光度重復性很差，它仍然不能滿(mǎn)足使用者的使用要求；反之，如果一臺紫外可見(jiàn)分光光度計的光度重復性符合使用要求，但其基線(xiàn)漂移大，它也不能滿(mǎn)足使用要求。只有基線(xiàn)漂移很小、重復性也很好的儀器才能滿(mǎn)足使用要求，才是好儀器。

（3）基線(xiàn)平直度的重要性

基線(xiàn)平直度是指每個(gè)波長(cháng)上的光度噪聲，它是用戶(hù)最關(guān)心的技術(shù)指標之一，也是儀器各個(gè)波長(cháng)上主要分析誤差的來(lái)源之一，它決定儀器在各個(gè)波長(cháng)下的分析檢測濃度的下限(或決定各個(gè)波長(cháng)下儀器的靈敏度)。

（4）線(xiàn)性動(dòng)態(tài)范圍的重要性

線(xiàn)性動(dòng)態(tài)范圍是影響分析測試誤差的技術(shù)指標。如果儀器的線(xiàn)性動(dòng)態(tài)范圍很寬，則無(wú)論是對很稀的樣品還是對很濃的樣品進(jìn)行分析時(shí)，其分析測試的結果都在所要求的誤差范圍內。所以應選擇線(xiàn)性動(dòng)態(tài)范圍大的紫外可見(jiàn)分光光度計。

其線(xiàn)性動(dòng)態(tài)范圍取決于儀器的雜散光和噪聲，它們是分測試誤差的主要來(lái)源。雜散光限制被分析測試樣品濃度的上限，噪聲限制被分析樣品濃度的下限。其線(xiàn)性動(dòng)態(tài)范圍非常重要，它限制儀器的使用范圍(即限制儀器的適用性)。

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